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聊一聊CAR-T的生產流程

發布時間: 2022-04-18  點擊次數: 4933次
 CAR-T產品的生產工藝有哪些環節?


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1)分選和凍存:用細胞分選儀對單采產物APH進行T細胞分選純化,藥明巨諾的工藝能夠將T細胞的純度提高到99%,以保障后續工藝的穩健性。純化的中間產物會經過程序降溫儀降溫,儲存于氣相液氮罐,準備進入后續生產工藝。

2)激活:技術人員從液氮罐中取出中間產物后,加入激活磁珠,完成T細胞激活,并置于二氧化碳培養箱進行激活培養。

3)轉導:激活后的T細胞完成慢病毒載體的CAR轉導。慢病毒可以轉導分裂期及非分裂期細胞,轉導效率高。其次從整合偏好性角度,慢病毒偏好整合非編碼區,相對安全。

4)擴增:轉導后的T細胞接種于生物反應器進行擴增工序,生物反應器采用封閉式自動化的動態擴增體系,以實現密閉生產環境及動態過程監控,灌流模式培養也比較有利于細胞增殖。整個擴增工序大概在5天左右。

5)收獲:擴增使CAR-T細胞達到收獲標準后進行收獲工序。收獲標準包括活細胞數、轉導效率、體外效價、T細胞純度。收獲工序包括清洗、去磁珠。

6)分裝:在生物安全柜內完成,分裝的CAR-T產品被保存于氣相液氮罐中,放行質檢合格后通知臨床做回輸準備。

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